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PCR儀詳解:原理、使用方法、常(cháng)見故障及(jí)維(wéi)修方法(fǎ),附帶維護保養指南(nán)

PCR儀概述

PCR儀(Polymerase Chain Reaction Instrument)是一(yī)種利用聚合酶鏈式反應(PCR)技術,對特定DNA片段進行體外擴增的精密儀器。PCR技術因其高度敏感、高效和高特異性,被廣泛應用於分子生物(wù)學、醫學診斷、遺傳學研究和犯罪學(xué)等領域。PCR儀通(tōng)過精確控製溫(wēn)度(dù)循環,實(shí)現DNA的(de)雙鏈分離、引物結合及新鏈合成,從而快速擴增目標DNA片段。

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原(yuán)理

PCR技(jì)術的基本原理依賴於DNA雙鏈在高溫(wēn)下變性成單鏈(liàn),低溫下引物與單鏈模板特異性(xìng)結合,並在適中的溫度下由DNA聚合酶催化合成新鏈(liàn)。這(zhè)一(yī)過程通過變性、退(tuì)火和延伸(shēn)三個步驟的循環進行,理論上經過N次循環,特定DNA片段可擴增至(zhì)2^N倍(bèi)。PCR儀作為溫控設備,能夠精確控製每個循環中的(de)溫度和時間,確保PCR反應的順利進(jìn)行。

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使用(yòng)方法

  1. 實驗準備:準備所需的試劑和儀器,包括模板DNA、引物(wù)、dNTPs、緩衝液和(hé)酶等,確保(bǎo)所有試劑精確配製並符合實驗要求。

  2. 樣品處理:對模板DNA進行純化,去(qù)除可能的抑製物(wù),並根據實驗需求調整(zhěng)濃度。

  3. 反應體係配(pèi)製:按照實驗手冊或設計方案,精確(què)配製PCR反(fǎn)應(yīng)體係,確保每種試劑(jì)的用量準確。

  4. 設置(zhì)程序:在(zài)PCR儀上設置反應程序,包括變性、退火和延伸的溫度及(jí)時間,以及循環次數。

  5. 放入樣品:將(jiāng)配製好的反應體係加入PCR管中,放(fàng)入PCR儀的相應位置。

  6. 啟動反應:啟動PCR儀,按照設定(dìng)的程序進(jìn)行反應。

  7. 結果分(fèn)析:反應結束後,通過(guò)電泳等方法分析擴增(zēng)產物,判斷實驗結(jié)果。


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常見故障及維修方(fāng)法

  1. 溫度不穩定

    • 現象:顯示溫度與實際設定不符或無法達到設定溫(wēn)度。

    • 原因:加熱/冷卻(què)係統故障,如加熱元件、風(fēng)扇或傳感器(qì)損壞(huài)。

    • 維修方法:檢(jiǎn)查並(bìng)更換損壞的部件,清潔加熱蓋,保持周圍環境通風(fēng)。

  2. 反應混合物沉積

    • 現象:PCR管內反(fǎn)應混合(hé)物沉積在管壁上。

    • 原因:反應液混合不均勻或離(lí)心不徹底。

    • 解決方法:確保充分混合反應液,並在每次使用前輕輕離心管子。

     

  3. 漏(lòu)液

    • 現(xiàn)象:PCR管子(zǐ)漏液。

    • 原因:封口不嚴或使用過期的密封膜。

    • 解決方(fāng)法:更換新的密封膜,確保正確(què)封口,避免移動或震動PCR板。

  4. 電源(yuán)問題

    • 現象:儀器無法啟動(dòng)或(huò)突然斷(duàn)電。

    • 原因:電源插頭未插緊或電源線路故障。

    • 解決方法:檢(jiǎn)查電(diàn)源插頭和線路,必要時(shí)更換電(diàn)源插座或尋求專業維修幫助。

  5. 程序失敗

    • 現象:程序運行失敗,無法完成預定循環。

    • 原因:計算機軟件設置錯誤、試劑盒質量問(wèn)題或操作步驟不正確。

    • 解決方法(fǎ):檢查程序設置,更換新的試劑(jì)盒,並按照操作手冊正確操作。

  6. 燈泡故障

    • 現象:紫外燈泡損壞,無法可視化DNA條帶。

    • 解決方法:及時更換損壞的燈泡,確保準確讀取結果(guǒ)。

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維護保(bǎo)養

  1. 定期清潔:使用無(wú)絨布塊蘸取75%酒精清潔儀器表麵和(hé)樣品台,保持通風口暢通無阻。

  2. 溫度校準:定期檢查PCR儀(yí)的溫度(dù)準確性,使用溫度驗證試(shì)劑盒進行檢測,必要時由專業人員重新校準。

  3. 熱蓋檢查:定(dìng)期檢查熱蓋是否損壞或密封不良,及時更換(huàn)或調整以確保試劑不蒸發。

  4. 樣品槽清潔:定期清洗樣品槽,去除可能的汙染物,確保實驗結果準確可靠。

  5. 電源管理(lǐ):在不使用PCR儀時,建議拔下(xià)電源插頭,避免長時間待(dài)機對儀器造成損害。

  6. 記錄管理:及時填(tián)寫設備使用記錄,記錄每次實驗的條件和結果(guǒ),以便追溯和分析。

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  通過以上措施,可以有效延(yán)長PCR儀的使用壽命(mìng),提高實(shí)驗結果的準確性(xìng)和(hé)可靠性。同時,遇到(dào)複雜故障時,建議及時聯係91视频网址入口機電的技術支(zhī)持或專業維修人(rén)員進行處理(lǐ)。

91视频网址入口機電維修過的PCR儀品牌和型號

   1、Thermo Fisher Scientific

(1)Applied Biosesystems係列:

   A、Veriti 96-Well Thermal Cycler

   B、SimpliAmp Thermal Cycler

   C、ProFlex PCR System

   D、QuantStudio 3 Real-Time PCR System

   E、QuantStudio 5 Real-Time PCR System

   F、QuantStudio 6 Flex Real-Time PCR System

   G、QuantStudio 7 Flex Real-Time PCR System

   H、QuantStudio 12K Flex Real-Time PCR System

   2、Bio-Rad

(1)T100係列:T100 Thermal Cycler

(2)S1000係列:S1000 Thermal Cycler

(3)C1000 Touch係列:C1000 Touch Thermal Cycler

(4)CFX係列:CFX96 Touch Real-Time PCR Detection System,

                         CFX384 Touch Real-Time PCR Detection System,

                         CFX Opus 96 Real-Time PCR System,

                         CFX Opus 384 Real-Time PCR System,

   3、 Eppendorf

(1)Mastercycler係(xì)列:Mastercycler Nexus,Mastercycler X50,Mastercycler                                             Pro,Mastercycler Gradient

   4、 Roche

(1)LightCycler係列:LightCycler 96 System,LightCycler 480 System II,

                                     LightCycler Nano,LightCycler 1536 Real-Time PCR                                                 System

   5、Agilent Technologies

(1)SureCycler 8800: 高性(xìng)能PCR儀

(2)AriaMx Real-Time PCR System: 實時(shí)熒光定量PCR係統

   6、Qiagen

(1)Rotor-Gene Q: 實時熒光定(dìng)量PCR係統

(2)QIAquant 96 5plex: 實時熒光定量PCR係統

   7、Analytik Jena

(1)Biometra TAdvanced: 高性能PCR儀

(2)Biometra TRobot: 自動化PCR係統(tǒng)

(3)qTOWER³: 實時熒光定量PCR係統

   8、Takara Bio

(1)Thermal Cycler Dice Touch: 高性能PCR儀

(2)Thermal Cycler Dice Real Time System III: 實時(shí)熒光定(dìng)量PCR係(xì)統

   9、Bioer Technology

(1)GeneMax係列:GeneMax

(2)LineGene係列:LineGene 9600 Plus,LineGene K Plus

(3)XP Cycler: 高性能PCR儀

   10、Techne (Bibby Scientific)

(1)TC-3000係(xì)列:TC-3000 Thermal Cycler,

(2)TC-5000係列:TC-5000 Thermal Cycler

(3)Prime係列:Prime Thermal Cycler,PrimeG Gradient Thermal Cycler

   11、Abbott

(1)m2000係列:m2000 RealTime System

   12、Cepheid

(1)SmartCycler II: 實時熒光定量PCR係統

(2)GeneXpert係列:GeneXpert Infinity,GeneXpert IV,GeneXpert XVI

   13、 Fluidigm

(1)Biomark HD: 實(shí)時熒光定量PCR係統(tǒng)

(2)Juno System: 高通量PCR係統

   14、Illumina

(1)Eco Real-Time PCR System: 實時(shí)熒光定量PCR係統

   15、Bioneer

(1)Exicycler 96: 實時熒光定(dìng)量PCR係統

(2)MyCycler: 高性能PCR儀

   16、盛賽爾(Sansure Biotech)

(1)MA-6000係列:MA-6000 Real-Time Quantitative Thermal Cycler

(2)MA-688係列:MA-688 Real-Time Quantitative Thermal Cycler

(3)MA-7000係列(liè):MA-7000 Real-Time Quantitative Thermal Cycler

(4)SLAN係列:SLAN-96P Real-Time PCR System,SLAN-48P Real-Time PCR                                  System

(5)San-Q係列:San-Q5 Real-Time Quantitative Thermal Cycler,

                             San-Q3 Real-Time Quantitative Thermal Cycler

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   91视频网址入口機電公司(sī)長期維修PCR儀,擁有接近30年的維修經驗,可以快速搶修好各類儀(yí)器(qì),另(lìng)外回收和銷售各(gè)類PCR儀,歡迎谘詢。 

 
 
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